Šajā pētījumā mēs sintezējām jaunu ARG sēriju

Strukturalny wpływ glikodendrymerów rekrutujących przeciwciała (ARG) na cytotoksyczność przeciwnowotworową

Endogēno antivielu vervēšana pret vēža šūnām pēdējās desmitgades laikā ir kļuvusi par uzticamu pretaudzēju imūnterapeitisku alternatīvu. Tika pierādīts, ka antivielu un audzēju saistošo moduļu (ABM un TBM) kovalentā piesaiste vienā, skaidri definētā sintētiskā molekulā patiešām veicina mijiedarbojoša trīskārša kompleksa veidošanos starp antivielām un mērķa šūnu, kas parasti vienlaicīgi imūnā mediēta šūnu iznīcināšana.

Iepriekšējā pētījumā mēs esam aprakstījuši pirmos antivielu vervēšanas glikodendrimerus (ARG), apvienojot cRGD kā αVβ3 ekspresējošas melanomas šūnu līnijas M21 un Rha ligandus kā dabiskā IgM ligandu, un parādījām, ka multivalence ir būtiska prasība šī kompleksa veidošanai. .

Šajā pētījumā mēs sintezējām jaunu ARG sēriju, kas sastāv no ABM, t.i., paškondensēts ramnozilēts ciklopeptīds un polilizīna dendrimērs, kas ir konjugēti ar TBM ar vai bez starplikas.

Plūsmas citometrijas un konfokālās mikroskopijas eksperimenti ar cilvēka serumu un dažādām šūnu līnijām atklāja, ka ABM ģeometrija būtiski ietekmē trīskāršā kompleksa veidošanos M21, turpretī BT 549 ar zemu integrīna ekspresiju nozīmīga saistīšanās nenotiek.

Turklāt ar šūnu dzīvotspējas testu mēs parādām, ka ARG izraisa augstu citotoksicitātes līmeni pret M21, kas arī ir cieši saistīts ar ABM struktūru. Jo īpaši mēs esam parādījuši, ka ARG, apvienojot ciklopeptīda serdi un zarus, ar vai bez starplikas, cilvēka seruma klātbūtnē kā unikālu imunitātes efektoru avotu izraisa 40-57% selektīvas citotoksicitātes pret M21 šūnām.

Visbeidzot, mēs arī uzsveram, ka starplika starp ABM un TBM ļauj palielināt imūno mediēto citotoksicitāti pat ar zemākas valences ABM.

ICELISA na bazie przeciwciał monoklonalnych do badania przesiewowego diazynonu w próbkach warzyw

Diazinons (DAZ) ir fosfora organiskais pesticīds (OP), ko parasti izmanto, lai novērstu un kontrolētu kaitīgus kaitēkļus, kas apdraud lauksaimniecības produktus. Šajā pētījumā mēs izstrādājām jaunu heteroloģijas pārklājuma stratēģiju DAZ imūnanalīzei. DAZ pārklājošo haptēnu var tieši konjugēt ar nesējproteīnu, neprasot starpliku.

Šī ierosinātā haptena pārklājuma stratēģija ietaupa laiku un ievērojami uzlabo imūnanalīzes jutīgumu, jo trūkst starplikas. Kā sintezētais pārklājošais antigēns tika izmantots, lai pārbaudītu monoklonālo antivielu (mAb).

Visbeidzot, izstrādātā netiešā konkurējošā ar enzīmu saistītā imūno analīze (icELISA) parādīja IC50 un noteikšanas robežas (LOD) vērtības attiecīgi 0,58 ng mL-1 un Eight pg mL-1.

Šī metode uzrādīja nenozīmīgu savstarpējo reaktivitāti pret citiem analogiem, un paraugu (gurķu, kāpostu un salātu) atgūstamība bija no 92,6% līdz 125,4%, ar dispersijas koeficientu (CV) zem 12%. Tika iegūta laba korelācija starp icELISA un augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfijas masu spektrometriju (HPLC-MS / MS). Ierosinātā icELISA bija ideāls līdzeklis DAZ atlieku uzraudzībai pārtikas paraugos.

Ocena nowatorskiej technologii wielu analitów opartej na cząsteczkach do wykrywania przeciwciał przeciw fibrylarynie

Sistēmiskā skleroze (SSc) ir neviendabīga autoimūna slimība, kas saistīta ar vairākām antivielu antivielām (ANA), ieskaitot tās, kas iekļautas klasifikācijas kritērijos (anti-centromēra, anti-topoizomerāze I (Scl-70), anti-RNS Pol III).

Tomēr retāk sastopamu antivielu, piemēram, anti-fibrilarīna (U3-RNP), kas rada netipisku nukleolāru modeli ar HEp-2 netiešās imūnfluorescences testu (IFA, ICAP AC-9), uzskata par slimību specifiskām un tām ir SSc klīniskās apakšgrupas. , tāpēc tai ir nozīme diagnozes noteikšanā un prognozēšanā.

Īpašs un jutīgs anti-fibrilarīna assessments būtu svarīgs papildinājums SSc seroloģiskajai diagnostikai un novērtēšanai. Šī pētījuma mērķis bija novērtēt jaunu uz daļiņām balstītu daudzanalītu tehnoloģiju (PMAT) anti-fibrilarīna antivielu noteikšanai.

Kopumā tika savākti 149 pacientu paraugi, tostarp 47 paraugi no Francijas (Liona un Parīze, n = 32) un Itālijas (Careggi slimnīca, Florence, n = 15), kas atlasīti, pamatojoties uz AC-9 HEp-2 IFA krāsošanu (> 1: 640 , clumpy nucleolar sample) un 102 kontroles, kas nav SSc (zarnu iekaisuma slimība (IBD) n = 20, Šegrena sindroms (SjS) n = 20, infekcijas slimība (ID) n = 7, sistēmiskā sarkanā vilkēde (SLE) n = 17, reimatoīdais artrīts (RA) n = 17 un veseliem cilvēkiem (HI) n = 21).

Visi paraugi tika pārbaudīti ar anti-fibrilarīna PMAT testu (tikai pētnieciskai lietošanai, Inova Diagnostics, ASV). Turklāt 47 anti-fibrilarīna pozitīvie paraugi tika pārbaudīti arī ar PMAT testiem, lai noteiktu citas autoantivielas ar ANA saistītās reimatiskās slimībās (AARD). Antifibrilarīna antivielu dati, kas veikti ar fluorescējoša enzīma imūnanalīzi (FEIA, Thermo Fisher, Vācija), bija pieejami 34 paraugiem. Anti-fibrillarīna PMAT assessments bija pozitīvs 31/32 (96,9%, Francija) un 12/15 (80,0%, Itālija) paraugos, kas iepriekš izvēlēti, pamatojoties uz AC-9 IIF modeli (starpība p = 0,09).

Kopumā PMAT assessments uzrādīja 91,5% (95% ticamības intervāls (TI): 80,1-96,6%) jutīgumu ar 100,0% (95% TI: 96,4-100,0%) specifiskumu kontrolēs, kas nav SSc. Tika panākta cieša vienošanās starp PMAT un FEIA ar 100,0% pozitīvu kvalitatīvu vienošanos (34/34) un kvantitatīvu vienošanos (Spīrmana rho = 0,89, 95% TI: 0,77,9–0,95%, p <0,0001).

Lai gan lielākā daļa antifibrilarīna pozitīvo paraugu bija monospecifiski (69,8%), daži izteica papildu antivielas (proti, Scl-70, centromēra, dsDNA, Ro52, Ro60, SS-B, Ribo-P, DFS70 un EJ).

Noslēgumā šis pirmais pētījums ar anti-fibrilarīna antivielām, kas izmērīts, izmantojot jaunu PMAT testu, parāda daudzsološus rezultātus, ja jaunajam PMAT testam bija augsta līmeņa vienošanās ar FEIA par anti-fibrilarīna antivielu noteikšanu.

Jaunu AFA testu, piemēram, PMAT, pieejamība var atvieglot klīnisko izvietošanu, papildu pētījumus, standartizācijas centienus un potenciāli AFA apsvēršanu nākamajām klasifikācijas kritēriju paaudzēm.

Porównywalne endemiczne przeciwciała specyficzne dla nukleoproteiny koronawirusa u pacjentów z łagodnym i ciężkim Covid-19

Covid-19 slimības smagums ir ļoti mainīgs, sākot no asimptomātiskas līdz kritiskām elpceļu slimībām un nāvi. Potenciālas krusteniski reaģējošas imūnās atbildes reakcijas starp SARS-CoV-2 un endēmisko koronavīrusu (eCoV) hipotētiski var veicināt šo mainīgumu. Mēs šeit pētījām, vai eCoV nukleoproteīnu (N) specifiskās antivielas pacientu ar vieglu vai smagu Covid-19 serumā ir saistītas ar Covid-19 smagumu.

Covid-19 pacientiem ar viegliem un smagiem simptomiem un veseliem SARS-COV-2 negatīviem pacientiem bija salīdzināms eCoV N specifisko antivielu līmenis infekcijas sākumā un pirmajā infekcijas mēnesī.

Šie rezultāti prasa turpmākus pētījumus, lai izpētītu eCoV specifisko antivielu potenciālo lomu imunitātē pret SARS-CoV-2 infekciju. Šis raksts ir aizsargāts ar autortiesībām. Visas tiesības aizsargātas.

TOP-Plus uz wszechstronna platforma biosensoryczna do monitorowania trwałości przeciwciał SARS-CoV-2

Priekšvēsture: Zemi sākotnējie SARS-CoV-2 antivielu titri, kas mēnešu laikā pēc inficēšanās pazeminās līdz nenosakāmam līmenim, ir radījuši bažas par ilgtermiņa imunitāti. Lai izprastu antivielu atbildes kvalitāti, jāpārbauda gan antivielu līmenis, gan antivielu un antigēnu mijiedarbības aviditāte.

Metodes: Tika izveidots testēšanas uz zondes “plus” panelis (TOP-Plus), kas ietvēra nesen izstrādātu aviditātes testu, kas iebūvēts iepriekš aprakstītajos SARS-CoV-2 TOP testos, kas mēra kopējo antivielu (TAb), aizstājēju. neitralizējošas antivielas (SNAb), IgM un IgG uz daudzpusīgas biosensora platformas.

TAb un SNAb līmenis tika salīdzināts ar aviditāti iepriekš inficētiem cilvēkiem 1,three un 6,2 mēnešus pēc inficēšanās 80 COVID-19 pacientu pāru paraugos. Tika novērtēta arī seruma no SARS-CoV-2 vakcinētām personām antivielu aviditāte.

Rezultāti: Jaunizveidotais aviditātes assessments šajā TOP panelī labi korelēja ar atsauces Bio-Layer Interferometry aviditātes testu (r = 0,88). TOP aviditātes testa neprecizitāte bija mazāka par 10%. Lai gan TAb un neitralizācijas aktivitāte (pēc SNAb) samazinājās laikā no 1,three līdz 6,2 mēnešiem pēc inficēšanās, antivielu aviditāte ievērojami palielinājās (P <0,0001).

Antivielu aviditāte 10 vakcinētiem SARS-CoV-2 indivīdiem (vidēji 28 dienas pēc vakcinācijas) bija salīdzināma ar izmērīto antivielu aviditāti inficētām personām (vidēji 26 dienas pēc inficēšanās).

Secinājums: Šis ļoti precīzs un daudzpusīgs panelis TOP-Plus ar iespēju izmērīt SARS-CoV-2 TAb, SNAb, IgG un IgM antivielu līmeni un atsevišķu serumu aviditāti uz viena sensora var kļūt par vērtīgu līdzekli ne tikai SARS-CoV uzraudzībā. -2 inficētiem pacientiem, wager arī indivīdu COVID-19 vakcinācijas reakcijas statuss.